| Congresso Brasileiro de Microbiologia 2023 | Resumo: 1339-1 | ||||
Resumo:Lipases microbianas são de grande interesse biotecnológico devido às suas inúmeras possibilidades de aplicação. Com diferentes gêneros produtores relatados na literatura, a espécie Geotrichum candidum é tida como uma das mais promissoras associada a síntese desta e de uma gama de enzimas. Quando cultivado na presença de indutores, o G. candidum produz uma lipase específica e incomum, que hidrolisa ácidos graxos de cadeias longas, de grande interesse para a indústria de alimentos. Quando extracelular, a recuperação dessas enzimas possui um alto custo de processo, o que impulsiona a busca por cepas com lipase naturalmente imobilizadas em seus micélios. A cepa UFMG−Y3225, isolada na região de Maringá ⟨PR⟩, foi cultivada em meio GYMP modificado ⟨2% glicose, 0,5% extrato de levedura, 1% extrato de malte, 0,2% fosfato de sódio e 1% azeite⟩ em frascos Erlenmeyers de 125 mL contendo 50 mL do meio, agitados em incubadora com agitação orbital a 30 •C, 200 rpm por 72 h. A atividade enzimática foi determinada por método titulométrico com NaOH ⟨0,05 M⟩ e fenolftaleína como indicador. Para análise da atividade da lipase imobilizada, foi utilizada a técnica de rompimento por homogeneização com esferas de vidro, empregando três diferentes tratamentos: cinco, seis e sete ciclos de cinco minutos de agitação e intervalos de dois minutos em banho de gelo. Ambos os resultados foram expressos em unidades de lipase ⟨U⟩ correspondente a 1 µmol de ácido graxo liberado por minuto. O experimento ocorreu em triplicata. As atividades específicas máximas da lipase foram observadas após 48 h de crescimento, com valores de 19,70 U/g e 3,25 U/mL, para a lipase imobilizada e extracelular, respectivamente. O melhor tratamento empregado no rompimento foi a homogeneização em seis ciclos com valores de atividade enzimática superior a cinco ciclos e iguais a sete ciclos. Neste estudo, foi observado que enquanto a atividade enzimática da lipase extracelular era reduzida após o tempo de produção máxima, a atividade da lipase ligada ao micélio se manteve constante nas 24 h que se sucederam, não sofrendo efeito da variação de pH do meio de cultivo ou da morte celular após esgotamento do substrato ⟨36 h&rang. É possível concluir que a cepa UFMG−Y3225 produz lipase imobilizada em micélio e que sua imobilização a protege de danos externos, evitando redução em sua atividade. Um estudo para otimizar a produção dessa enzima empregando a cepa é necessário para obtenção de maiores rendimentos. Palavras-chave: Enzimas, Enzimas microbianas, Intracelular, Biomassa, Rompimento celular Agência de fomento:CNPq | |||||